[摘要]
目的 探讨四妙勇安汤调控神经生长因子(NGF)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成酶激酶3β(GSK3β)通路对糖尿病足大鼠血管生成和微循环及创面愈合的影响。方法 选取40只无特定病原体级SD雄性大鼠,分为正常对照组(NO组)、模型组(MO组)、二甲双胍组(DM组)、四妙勇安汤组(SD组),每组10只。对MO组、DM组、SD组采用腹腔注射链脲佐菌素+足部造矩形切口建立糖尿病足模型,NO组不建立该模型,建模成功后,对DM组灌胃0.2 g/kg二甲双胍,对SD组灌胃50 g/kg四妙勇安汤,NO组、MO组同期灌胃等容积0.9%氯化钠溶液。观察并记录创面愈合情况,苏木精-伊红染色检测皮肤组织病理形态,激光多普勒仪检测微循环相关指标,蛋白质印迹法检测皮肤组织血管生成及NGF/Akt/GSK3β通路相关蛋白表达,体外细胞实验验证四妙勇安汤对NGF/Akt/GSK3β通路的作用。结果 MO组给药后1、2、3、4周末创面愈合率、足部血流灌注量(PU)以及皮肤组织血管内皮生长因子(VEGF)、NGF、Akt蛋白表达均低于NO组,GSK3β蛋白表达高于NO组,DM组、SD组给药后1、2、3、4周末创面愈合率、PU以及皮肤组织VEGF、NGF、Akt蛋白表达均高于MO组,GSK3β蛋白表达低于MO组,且SD组比DM组变化更显著(均P<0.05)。NO组皮肤组织细胞结构正常,MO组皮肤组织出现明显病理改变,与MO组比较,DM组、SD组病理形态明显改善。体外实验结果显示,大鼠原代胰岛细胞加入50 g/kg四妙勇安汤后VEGF、NGF、Akt蛋白表达高于,而GSK3β蛋白表达低于加入等容积磷酸盐缓冲液[(2.35±0.23)比(1.48±0.16)、(2.18±0.22)比(1.39±0.15)、(2.21±0.24)比(1.43±0.16)、(1.19±0.13)比(2.22±0.24)](均P<0.001)。结论 四妙勇安汤可显著促进糖尿病足大鼠血管生成及创面愈合,并有效改善微循环,其作用机制可能与调控NGF/Akt/GSK3β通路有关。